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資訊

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PCR儀的使用方法

2012-06-19

  步驟:

  1、開機:打開開關,視窗上顯示“SELF TEST”,顯示10秒中后,顯示RUN-ENTER菜單:

  準備執行程序。

  2、放入樣本管,關緊蓋子。

  3、如果要運行已經編好的程序,則直接按《Proceed》,用箭頭鍵選擇已儲存的程序,按《Proceed》,則屏幕顯示:

  按《Proceed》選擇ENABLE,則開始執行程序。

  4、如果要輸入新的程序,則在RUN-ENTER菜單上用箭頭鍵選擇ENTER PROGRAM,按《Proceed》,屏幕顯示

  按《Proceed》,1)選擇NEW,命名新的程序,最多8個字母,輸入后按《Proceed》確認(如何輸入字母、數字)。

  2)輸入程序步驟:名字輸入后,顯示

  按《Proceed》則可以輸入溫度(0~100℃),按《Proceed》確認后,則可以輸入孵育時間,用《Select》鍵移動光標,輸入數字,完成后按《Proceed》確認,跳到下一步,輸入方式同上。

  3)選擇GOTO,輸入循環步驟時鏈接到第幾步(循環數最多可達9999次)(為實際循環數-1)。

  4) 選擇option,顯示

  再選擇increment,按《Proceed》確認,輸入初始的溫度,確認后輸入時間,按《Proceed》確認,然后輸入每個循環增加或減少的溫度,增加用正值,減少用負值(-0.1℃~6℃),按《Proceed》確認。

  選擇extend, 按《Proceed》確認,輸入每個循環增加或減少的時間(-60~60秒),按《Proceed》確認。

  選擇slop(指溫度上升或下降的速率),輸入溫度的改變值(-0.1~1.5℃)按《Proceed》確認,然后輸入加熱或致冷的速度,按《Proceed》確認。

  4)選擇End,輸入結束步驟。

  5、輸入完成的程序后,到RUN-ENTER菜單,選擇新程序,開始運行。

  6、其它:用《pause》可以暫停一個運行的程序,再按一次繼續程序。

  用《stop》或《Cancel》可停止運行的程序。

  編輯程序:

  1、可以用《Cancel》鍵刪除輸錯的值,輸入新的值后按《Proceed》確認。

  2、對于未輸完的程序,要先輸入END,按《Proceed》將程序儲存后才能刪除。

  3、刪除已經儲存的程序:從RUN-ENTER菜單中選擇RUN-PROGRAM,按《Proceed》,顯示主菜單,選擇DELET,用《Select》選擇刪除。

  4、查看程序的步驟:在主菜單上選擇LIST,按《Proceed》,用《Select》將選擇名稱,再按《Proceed》,顯示程序的第一步,用《Select》鍵向前、向后翻頁查看,此時不能改變程序的值。

  編輯已有的程序:

  1、從RUN-ENTER菜單中選擇RUN-PROGRAM,按《Proceed》,顯示主菜單,選擇EDIT,按《Proceed》確認,用《Select》鍵選擇要編輯的程序,按《Proceed》顯示程序的第一步。

  2、用《Select》鍵將光標移到要改變的溫度或循環的值上,鍵入新值,按《Proceed》確認,按《Cancel》刪除鍵入的值,出現空格,鍵入新值后確認。

  注:一旦值被改變或刪除,原來的值不能恢復,必須重新鍵入。

  3、編輯時間值:必須重新鍵入小時、分鐘、秒,按《Proceed》。

  如何設置一個PCR體系:

  一般分為8步:

  1、預變性:可用94~95℃,2~10min,一般用5min。

  2、變性:一般用94℃,30s~2min,一般45s~1min。

  3、退火:溫度自定,30s~2min。

  4、延伸:70~75℃,一般72℃,對于<2kb,<1min;>2kb,每增加1kb加1min。

  5、循環數:一般25~35個循環。

  6、最終延伸:72℃,5~15min。

  7、保存:10℃,時間設為0。

  8、END。

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